Amplification - 2ème étape
Méthode :
On va multiplier le nombre des ADNc des gènes d'intérêt (x 235), grâce à des amorces spécifiques, et les marquer par fluorescence. A chaque cycle, on relève le niveau de fluorescence. Vidéo
Complément :
L'amplification se fait sur des plaques de 96 puits. Donc 96 expériences en 1 plaque. Pour 1 protocole, il faut en général plusieurs plaques
Sur chaque plaque plusieurs échantillons, souvent en triplicate (répliqué 3 fois), et plusieurs gènes.
Chaque ligne représente la fluorescence dans un puits, donc sur ce graphique, 96 lignes. A chaque cycle, l'intensité de la fluorescence augmente. Cette augmentation de fluorescence est proportionnelle au nombre d'ADNc fabriqués, qui est proportionnel au nombre d'ARNm initialement présent dans chaque échantillon.